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    肽纯化有哪些典范的题目(1)

    作者:andy       公布>###nbsp;     

    1.多肽试样在上制备柱前为何要做好预处置?有什么预处置的措施?

    答:制备用到的色谱柱子因加工的样品多,比用来剖析色谱柱愈加容易受净化,关于必要过柱样品举行得当的预处置可以很好的延缓制备柱的利用年限。样品预处置根本方法有:萃取、过滤、离心、上预柱。

    色谱柱

    2.为何活动相里必要添加三氟乙酸用作离子对试剂?另有什么活动相系统或离子对试剂实用于多肽的分散纯化?

    答:现阶段比力罕见的活动相系统是水配乙腈,以三氟乙酸(TFA)为离子对试剂。针对差别的多肽公道选择梯度洗脱分散多肽。

    添加TFA能控制洗脱液的PH,而且作为离子对试剂与多肽会协同作用,可以进步分散结果,大幅提拔样品峰形。也能用作多肽分散纯化的活动相系统或离子对试剂有:醋酸系统,磷酸系统,盐酸系统,七氟丁酸等。依据调解PH也可以获得十分好的分散结果。

    3.怎样选择纯化流程所利用的色谱柱填料?

    答:纷歧样的序列其多肽理化性子及疏水性有很大的区别。大局部状况分子量<4000和亲水性多肽用C18柱分散结果zui佳。分子量>5000和疏水性强的多肽以C4柱分散结果zui佳。

    C8色谱柱处于C18C4两头,他的运用结果更倾向C18;对局部特别选择性的多肽,也可以思索苯基柱和聚合物色谱柱。

    4.在纯化关键中挑选聚合物填料的思绪是什么?

    答:必要利用情况温度条件举行或凌驾惯例pH纯化时;可以利用pH范围更宽的聚合物色谱柱。其上风是在jipH情况下不克不及降解,能用强碱与强酸用作活动相举行分散纯化。

     

     

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